WWW.MASH.DOBROTA.BIZ
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - онлайн публикации
 

«Ситдикова Татьяна Сергеевна ИММУННЫЕ МЕХАНИЗМЫ РЕАЛИЗАЦИИ ФЕНОТИПОВ И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ У ДЕТЕЙ ...»

На правах рукописи

Ситдикова Татьяна Сергеевна

ИММУННЫЕ МЕХАНИЗМЫ РЕАЛИЗАЦИИ ФЕНОТИПОВ

И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ

У ДЕТЕЙ

14.03.09-Клиническая иммунология, аллергология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата

медицинских наук

Владивосток – 2019

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном

учреждении высшего образования «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Просекова Елена Викторовна

Официальные оппоненты:

Файзуллина Резеда Мансафовна - доктор медицинских наук, профессор, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, профессор кафедры факультетской педиатрии с курсами педиатрии, неонатологии и симуляционным центром ИДПО Калинина Елена Петровна – доктор медицинских наук, Владивостокский филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» - Научно - исследовательский институт медицинской климатологии и восстановительного лечения, старший научный сотрудник лаборатории биомедицинских исследований

Ведущая организация:

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства России

Защита диссертации состоится «19» марта 2019 года в 10 часов на заседании объединенного совета по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук, на соискание ученой степени доктора наук Д.999.195.03 на базе Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Тихоокеанский государственный медицинский университет»

Министерства здравоохранения Российской Федерации, федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования «Дальневосточный федеральный университет», федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.П. Сомова»

по адресу: 690002, г. Владивосток, проспект Острякова, д. 2 .

С диссертацией можно ознакомиться в Библиотечном информационном центре Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Тихоокеанский государственный медицинский университет»

Министерства здравоохранения Российской Федерации и на сайте http://tgmu.ru Автореферат разослан « » ____________2019 года

Ученый секретарь диссертационного совета Зайцева ЕленаАлександровна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования, степень ее разработанности Бронхиальная астма (БА) – хроническое гетерогенное заболевание, в развитии которого важную роль играют иммунологические механизмы. Индивидуальный подбор терапии для достижения контроля бронхиальной астмы требуют глубокого анализа факторов ответственных за прогрессирование болезни, развитие обострений, учета биологических фенотипов и особенностей патогенетических нарушений (Ненашева Н.М., 2014; Резанович А.И., 2016; Астафьева Н.Г., 2016;





Alexis N. E., 2014) .

Несмотря на определенные успехи, достигнутые в области патофизиологии бронхиальной астмы, остается ряд вопросов о значимости иммунных механизмов в реализации различных фенотипов астмы (Гамойленко И.Н., 2004; Нурдина М. С., 2017;

Lambrecht B. N., 2015). Регуляторные звенья иммунной системы определяют клеточный состав воспаления, спектр и активность продукции цитокинов, направленность взаимодействия иммунокомпетентных клеток. Согласно современным представлениям нарушения иммунного гомеостаза, с дисбалансом в соотношении Th1/Th2 лимфоцитов, определяют тип иммунного реагирования и являются основой формирования IgЕзависимого аллергического воспаления при БА. Изменения в иммунной системе ведут к хронизации процесса и развитию иммунодефицитных состояний (Гамойленко И.Н., 2004; Нурдина М. С., 2017; Резанович А. И., 2016; Кайб И. Д., 2016; Hirose K., 2017;

Lambrecht B. N., 2015; Chkhaidze I., 2016; Bhakta, N. R., 2014) .

Изучение процессов патогенеза на клеточном и молекулярном уровнях приводит к пониманию персонализированной медицины и определяет перспективные направления научных исследований, стратегию диагностики и лечения пациентов. На современном этапе в изучении патогенеза БА приоритетны исследования механизмов врожденного и адаптивного иммунного ответа и поиск новых патогенетически обоснованных подходов в диагностике, профилактике и лечении (Курбачева О. М., 2016; Княжеская Н. П., 2013; Свитич О. А., 2016; Зыков К. А., 2013) .

Анализ фенотипических особенностей иммунопатогенетических механизмов и эффективности различных программ фармакологического контроля заболевания, способствует оптимизации выбора лекарственных средств с учетом варианта БА и выраженности воспаления дыхательных путей (Резанович А. И., 2016;

Княжеская Н. П., 2013; Овсянников Д. Ю., 2016; Колхир П. В., 2010; Ltvall J., 2011) .

Патогенетическая значимость иммунных механизмов фенотипов БА обосновывает включение в программы терапии иммунотропных препаратов для достижения контроля над заболеванием и улучшения качества жизни пациентов .

В литературных источниках недостаточно данных по сравнительной клиникоиммунологической эффективности применения иммунотропных препаратов в комплексной терапии аллерген и вирус-индуцированного фенотипов БА у детей .

Цель исследования Анализ иммунных механизмов реализации аллерген и вирус-индуцированного фенотипов бронхиальной астмы у детей для оптимизации фармакологического контроля .

Задачи исследования

1. Определение особенностей клинико-лабораторных характеристик фенотипов бронхиальной астмы детей, проживающих в Приморском крае .

2. Изучение показателей врожденного и адаптивного иммунного ответа детей с БА и здоровых сверстников .

3. Оценка иммунных механизмов вирус-индуцированного и аллергениндуцированного фенотипов бронхиальной астмы у детей .

4. Проведение сравнительного анализа клинико-иммунологической эффективности противовоспалительной и иммунотропной терапии при вирус и аллергениндуцированной бронхиальной астме у детей .

Научная новизна Получены новые данные об особенностях клинико-лабораторных характеристик и иммунных механизмах патогенеза аллерген и вирусиндуцированного фенотипов бронхиальной астмы у детей .

Выявлены различия клеточной обеспеченности, функционирования иммунокомпетентных клеток и продукции оппозитных цитокинов у детей при аллерген и вирус-индуцированном фенотипах бронхиальной астмы. Вирусиндуцированный фенотип болезни характеризуется количественными нарушениями натуральных киллеров, Т-киллеров эффекторов и Т-клеточной цитотоксичности, дисбалансом регуляторных факторов, снижением продукции клетками периферической крови INF. Для аллерген-индуцированного фенотипа болезни характерны структурно-функциональные девиации в иммунном ответе, системе регуляции, связанные с дисбалансом Th1/Th2 лимфоцитов и гиперпродукцией клетками периферической крови IL-4 .

На основе комплексного иммунологического мониторинга, впервые проведен сравнительный анализ эффективности применения глюкозаминил-мурамилдипептида и бактериальных лизатов в программах терапии аллерген и вирус-индуцированного фенотипов бронхиальной астмы у детей .

Теоретическая и практическая значимость Определены доверительные интервалы показателей клеточного иммунитета, спонтанной и индуцированной продукции клетками периферической крови IFN и IL-4 у детей, проживающих в Приморском крае .

Выявлены различия в иммуннопатогенезе вирус и аллерген-индуцированного фенотипов БА у детей. Проведен сравнительный анализ клинико-иммунологической эффективности комплексных программ терапии с включением иммунотропных препаратов (бактериальных лизатов, глюкозаминилмурамилдипептида) при аллерген и вирус-индуцированном фенотипах болезни .

Разработаны и внедрены в образовательный процесс, практическое здравоохранение Приморского и Хабаровского краев методические рекомендации:

- Особенности показателей врожденного и адаптивного иммунитета здоровых детей, проживающих в городе Владивостоке: метод. рекомендации / Е.В. Просекова, Т. С. Ситдикова, А. И. Турянская [и др.]. – Владивосток, 2017 – с. 16

- Распространенность, клинико-иммунологические особенности и программы фармакологического контроля различных фенотипов бронхиальной астмы у детей в Приморье: метод. рекомендации / Е. В. Просекова, Т. С. Ситдикова, А. И. Турянская [и др.]. – Владивосток 2017. – с. 28 .

Методология и методы исследования Настоящее исследование является самостоятельным фрагментом плановой научно-исследовательской работы Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (№ гос. регистрации 01201376966). Исследование проспективное, сравнительное, контролируемое, соответствует основным методологическим принципам (комплексность, целостность, объективность и достоверность). Предметом исследования явились показатели врожденного и адаптивного иммунного ответа, цитокин продуцирующая активность клеток периферической крови у детей с аллерген и вирус-индуцированным фенотипами бронхиальной астмы. Работа базируется на принципах доказательной медицины и выполнена в соответствии с современными представлениями об иммунопатогенезе фенотипов бронхиальной астмы. В работе применялись иммунологические, гематологические методы, сравнительный анализ клинической эффективности программ фармакологического контроля, статистические методы. В исследование было включено 150 детей, 120 детей с верифицированным диагнозом бронхиальной астмы и 30 здоровых сверстников. С учетом цели и поставленных задач, исследование состояло из двух этапов: на первом этапе проводился анализ иммунологических механизмов реализации аллерген и вирус-индуцированного фенотипов бронхиальной астмы у детей, их особенности и различия; на втором этапе проведен сравнительный анализ клинико-иммунологической эффективности иммунотропной терапии (бактериальных лизатов, глюкозаминилмурамилдипептида), при аллерген и вирусиндуцированном фенотипах болезни .

Комплексное клинико-иммунологическое исследование проводилось в амбулаторных условиях по единой схеме. Клиническое исследование одобрено локальным Междисциплинарным комитетом по этике ФГБОУ ВО ТГМУ Министерства здравоохранения РФ протокол №8 от 24.04. 2015 года .

Положения, выносимые на защиту

1. У детей, проживающих в Приморском крае, в преобладающем большинстве реализуются аллерген-индуцированный и вирус-индуцированный фенотипы бронхиальной астмы, различающиеся по клинико-лабораторным характеристикам и спектру иммуннопатогенетических механизмов .

2. У детей с вирус-индуцированным фенотипом БА выявлены стойкие структурнофункциональные изменения клеточного иммунитета обеспеченности натуральными киллерами, Т-киллерами и Т-клеточной цитотоксичности. В группе детей с аллерген-индуцированным фенотипом болезни наблюдается дисрегуляция иммунного ответа, изменение функциональной и пролиферативной активности Тлимфоцитов, гиперпродукция клетками периферической крови IL-4 .

3. Иммунотропные препараты в программах терапии аллерген и вирусиндуцированного фенотипов БА у детей корректируют иммунные структурнофункциональные нарушения, повышают эффективность контроля болезни .

Степень достоверности и апробация результатов Степень достоверности результатов определяется соответствием дизайна исследования критериям доказательной медицины, достаточным объемом наблюдений, репрезентативностью комплексного обследования пациентов с использованием валидных методов исследования и обработки полученных данных методами статистического анализа с использованием программных пакетов анализа ««Statistica 10», кластерного анализа непараметрический дисперсионный анализ «ANOVA Краскела-Уоллиса», многомерного корреляционного анализа с построением плеяд по В.П. Терентьеву (1975) .

Сформулированные задачи соответствуют цели исследования. Результаты исследования, положения, выводы и практические рекомендации аргументированы фактическим материалом и анализом полученных данных .

Материалы диссертации представлены и обсуждены на научно-практических конференциях и симпозиумах международного, регионального и местного уровня:

IV Международной научно-практической конференции «Научное и образовательное пространство: перспективы развития» (г. Чебоксары, 2017); IV Международной научно-практической конференции «Научные исследования: теория, методика и практика» (г. Чебоксары, 2018); Тихоокеанском медицинском конгрессе с международным участием: XIII, XIV (г. Владивосток, 2016, 2017); Научнопрактической школе-конференции «Аллергология и клиническая иммунология (иммунодиагностика, иммунопрофилактика, иммунотерапия)» (г. Сочи 2017, 2018);

Х, XIV, XV, XVI, Региональной научно-практическая конференция «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии, клинической лабораторной диагностики»

(г. Владивосток, 2015, 2016, 2017, 2018); Краевом научно-практическом семинаре «День аллерголога-иммунолога» (г. Владивосток 2015, 2016, 2017, 2018) .

Личное участие автора Личный вклад автора состоит в участии планирования исследования, подготовке аналитического обзора литературных источников по проблеме исследования, формировании групп пациентов, включенных в исследование, сбор материала, комплексное иммунологическое обследование. Статистическая обработка полученных результатов, их анализ, формулировка выводов и практических рекомендаций, подготовка публикаций и докладов на научных конференциях, написание диссертации выполнено лично автором. Доля личного участия автора в получении и анализе материалов исследования составляет не менее 80%. Кластерный анализ выполнен при содействии доктора физико-математических наук, старшего научного сотрудника ФГБУН «Институт автоматики и процессов управления» Дальневосточного отделения Российской академии наук Ждановой Оксаны Леонидовны .

Публикации По теме диссертации опубликовано 15 печатных работ, в том числе 7 статей в журналах, включенных в «перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученой степени доктора и кандидата наук», утвержденных ВАК из них 1 статья опубликована в журнале, индексируемом Scopus, 1 статья Web of Science. Разработаны и внедрены в практическое здравоохранение методические рекомендации: «Особенности показателей врожденного и адаптивного иммунитета здоровых детей, проживающих в городе Владивостоке», «Распространенность, клиникоиммунологические особенности и программы фармакологического контроля различных фенотипов бронхиальной астмы у детей в Приморье» .

Объем и структура диссертации Материал диссертации изложен на 131 страницах текста. Структура работы состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы исследования», трех глав, содержащих результаты собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, включающего 284 источника из них 150-зарубежные. Работа иллюстрирована 19 таблицами и 29 рисунками .

Материалы и методы

Основные направления в настоящей работе включали:

- изучение клинико-лабораторных характеристик фенотипов бронхиальной астмы среди детского населения Приморского края;

- анализ показателей врожденного и адаптивного иммунного ответа у детей с БА и здоровых сверстников;

- оценку иммунных механизмов патогенеза вирус-индуцированного и аллергениндуцированного фенотипов бронхиальной астме у детей;

сравнительный анализ клинико-иммунологической эффективности противовоспалительной терапии и иммунотропных препаратов при вирусиндуцированной и аллерген-индуцированной бронхиальной астмы у детей .

Для выполнения поставленных задач проанализированы медицинские документы, проведено анкетирование, осмотр и обследованием 1887 детей с верифицированным диагнозом бронхиальной астмы, проживающих в Приморском крае. Дети с БА наблюдались в Городском аллерго-респираторном центре, здоровые сверстники обследованы в Центре Здоровья для детей и взрослых КГБУЗ «Владивостокский клинико-диагностический центр», главный врач А.А. Кабиева .

Структурно-функциональные характеристики иммунного ответа исследовали у 120 детей с БА и 30 здоровых сверстников. Клинико-иммунологические параметры оценивали у детей с аллерген-индуцированным (n=60) и вирус-индуцированным (n=60) фенотипами болезни в динамике терапии ИГКС и в сочетании с иммунотропными препаратами (бактериальные лизаты, глюкозаминилмурамилдипептид). Группы сравнения были сопоставимы по возрасту и полу .

Критериями исключения из исследования являлись: острое респираторное заболевание, легкое или тяжёлое течение и/или обострение бронхиальной астмы, применение иммунокорригирующих препаратов в предшествующие шесть месяцев .

Дизайн работы одобрен независимым междисциплинарным этическим комитетом при ФГБОУ ВО ТГМУ Минздрава России (протокол №8 от 24.04. 2015 года) .

–  –  –

Легкое течение болезни отмечено у 12,8±2,14 %, клиническое течение средней степени тяжести у 70,5±1,24 %, БА с тяжелым течением диагностирована у 16,5±2,1 % .

В младшей возрастной группе легкое течение болезни зафиксировано в 10,4±1,21 %;

средне тяжелое течение до трех лет у 72,9±2,07 %, тяжелое течение болезни регистрировалось до трех лет у 16,8±2,1 %. Средний показатель АСТ-теста у младших школьников составил 18,8±1,5 балла .

БА с ранним дебютом отмечена у 45,81±1,25 % детей, первые клинические симптомы болезни в младшем школьном возрасте регистрировались в 52,07±1,69 % .

Средний возраст реализации БА у детей, проживающих в Приморском крае составил 8,60±0,23 лет. Дебют клинических проявлений различных аллергических заболеваний до двухлетнего возраста зафиксирован у 53,89±1,56 % страдающих БА .

У детей с БА от 7-11 лет отмечена сенсибилизация бытовыми (34,90±1,89 %), эпидермальными (25,00±1,71 %), пыльцевыми (18,00±1,52 %) и грибковыми аллергенами (8,00±1,07 %), смешенный вариант сенсибилизации в 14,00±1,26 % случаев. В клиническом анализе крови преобладает высокий удельный вес эозинофилов 8,21±1,08 %, показатели лейкоцитов, лимфоцитов, нейтрофилов, соответствуют референсным значениям (7,39±0,13 109/л, 2,70±0,19 109/л, 4,08±0,26 109/л) .

Проведенные исследования отметили высокий удельный вес форм болезни с клиническим течением средней тяжести в 70,58±1,24 %, с преобладанием у детей младших возрастных групп, и причинной значимостью в инициации и развитии болезни респираторных вирусных инфекций. У детей с БА, младшего школьного возраста диагностирована сенсибилизация бытовыми и эпидермальными аллергенами и клинические проявления аллергии, высокое относительное и абсолютное содержание эозинофилов в периферической крови и преобладание клинического течения болезни легкого и средней тяжести .

Среди детей с БА, проживающих в Приморском крае выявлен значимый удельный вес аллерген-индуцированного и вирус-индуцированного фенотипов, с превалированием первого у младших школьников, второго в младшем и дошкольном возрасте .

Показатели клеточного звена иммунитета и продукции оппозитных цитокинов клетками периферической крови детей с бронхиальной астмой и здоровых сверстников Дизайн работы включал анализ комплекса структурно-функциональных характеристик иммунокомпетентных клеток, спонтанной и индуцированной продукции IFN и IL-4 у детей с верифицированным диагнозом БА и здоровых сверстников, проживающих в Приморском крае .

При попарном сравнении показателей гемограммы и иммунного статуса детей с БА и здоровых сверстников у детей с реализацией болезни отмечена нейтрофилия (р‹0,05), снижение абсолютного числа лимфоцитов (р‹0,01), В-лимфоцитов (р‹0,05), Т-лимфоцитов (р‹0,05) с увеличением экспрессии маркеров ранней активации на поверхности Т-лимфоцитов (р‹0,05) (Рисунок 1) .

–  –  –

Рисунок 1- Содержание иммунокомпетентных клеток в периферической крови детей с БА и здоровых сверстников, *-р0,05, **-р0,01 .

Спонтанная продукция IFN и IL-4 клетками периферической крови здоровых детей составила-11,70±0,88 пг/мл и 1,72±0,07 пг/мл, а у детей с БА - 8,97±0,78 пг/мл и 4,72±0,35 пг/мл, p0,001. Средний уровень индуцированной митогеном продукции оппозитных IFN и IL-4 цитокинов клетками периферической крови здоровых сверстников составил 29,68±0,57 пг/мл и 3,59±1,3 пг/мл, а у детей с БА показатели отличались - 15,81±1,58 пг/мл и 19,09±1,81 пг/мл, р0,001. При стимуляции клеток периферической крови митогеном отмечено увеличение продукции IFN у всех здоровых детей и только 17,5 % детей с БА, нарастание синтеза IL-4 у трети здоровых детей и 93,33 % детей с БА .

Проведенные исследования структурно-функциональной организации иммунного ответа у детей с бронхиальной астмой в сравнении со здоровыми сверстниками зафиксировали различия в содержании, активности иммунокомпетентных клеток и синтезе оппозитных цитокинов .

Многомерный корреляционный анализ структурно-функциональных характеристик иммунологических показателей, с построением плеяд по П. Терентьеву, отметил различия в спектре, силе и направленности взаимосвязей звеньев иммунного ответа у здоровых и детей с БА .

У детей с БА ведущими являются корреляции процессов синтеза оппозитных цитокинов, эозинофилии и структуры субпопуляций Т-лимфоцитов .

Обеспеченность и функциональная активность иммунокомпетентных клеток при различных фенотипах бронхиальной астмы В группе детей с аллерген-индуцированной БА иммунологические показатели составили: CD3+CD19- - 1902,83±112,39кл/мкл, CD3+CD4+ - 953,42±58,12 кл/мкл, CD3+CD8+ - 799,42±65,03 кл/мкл, CD3-CD19+ - 412,92±34,35 кл/мкл, CD3CD16+/CD56+ - 327,04±12,87 кл/мкл, CD3+/CD16+/CD56+ - 178,92±11,53 кл/мкл .

У детей с вирус-индуцированным фенотипом болезни доверительные интервалы содержания Т-лимфоцитов с маркерами ранней активации составили 179,65-228,35, при среднем уровне числа Т-лимфоцитов с экспрессией маркеров поздней активации 579,21±42,01 кл/мкл. В группе детей с аллерген-индуцированной CD3+CD25+ астмой доверительные интервалы 162,48-215,79 кл/мкл и CD3 /HLA-DR - 329,20±22,01 кл/мкл .

При организация иммунологических показателей детей с различными фенотипами БА кластерным анализом определено два крупных кластера, находящихся на большом расстоянии друг от друга, различающихся по структуре и функциональной активности иммунокомпетентных клеток. В первый кластер распределились дети с аллерген-индуцированным фенотипом, во второй - дети с вирус-индуцированным фенотипом БА. Результаты кластеризации представлены вертикальной дендрограммой (Рисунок 2).Второй кластер детей с БА характеризуется девиацией содержания лейкоцитов и нейтрофилов, высокой экспрессией маркеров поздней активации Т-лимфоцитов. В первом кластере дети с высоким количеством эозинофилов в периферической крови .

У детей при аллерген и вирус-индуцированном фенотипах БА выявлены различия иммунопатогенетических механизмов. При вирус-индуцированном фенотипе болезни дисбаланс Т-клеточной цитотоксичности, снижение показателей Т лимфоцитов цитолитических, с тесными прямыми взаимосвязями пролиферации и функциональной активности субпопуляций Т-лимфоцитов, отрицательными корреляциями показателей цитотоксических Т-лимфоцитов с В-лимфоцитами. При аллерген-индуцированном фенотипе отмечены изменения в системе адаптивного реагирования, в пролиферации с нарушением процессов негативной регуляции .

–  –  –

Рисунок 3 - Показатели спонтанной и митоген-индуцированной продукции IFN и IL-4 клетками периферической крови детей с различными фенотипами БА, *- р0,01, **- р0,001 .

Кластерный анализ показателей выработки цитокинов выявил различия с организацией трех крупных кластеров .

В первом кластере низкая спонтанная и митоген индуцированная продукция клеток IFN в сочетании с высоким синтезом IL-4 при индуцированной активации, во втором кластере физиологические показатели цитокиновой продукции, в третьем кластере угнетение спонтанной и индуцированной выработки IFN с высокими показателями IL-4 (Рисунок 4) .

Самое большое расстояние отмечено между группой здоровых детей и группой с аллерген-индуцированным фенотипом БА – 3.4. По расстояниям – кластеры детей с бронхиальной астмой ближе друг к другу, чем к здоровым – 1.7. Расстояние между группой здоровых детей и группой с вирус-индуцированным фенотипом – 2 .

Рисунок 4 - Дендрограмма кластеров спонтанной и митоген индуцированной способности клеток к продукции IL-4, IFN детей с БА и здоровых сверстников (VI_li, VI_is, VI_b - кластер вирус-индуцированного фенотипа; A_li, A_is, A_b - кластер аллергениндуцированного фенотипа БА, С - кластер здоровых детей) .

В группах сравнения по фенотипам БА выявлены вариативные по степени и интенсивности особенности организации иммунного ответа, продукции оппозитных цитокинов с дефектом продукции IFN, более выраженным при вирусиндуцированном варианте .

При аллерген-индуцированной БА низкая спонтанная и индуцированная продукция IFN, сочетается с высокими показателями продукции IL-4, эозинофилией в периферической крови и определяются достоверные корреляции структурных и функциональных иммунологических показателей .

Активация продукции IL-4 и пролиферации Т-хелперов в сочетании с нарушениями процессов негативной регуляции являются предрасполагающими факторами реализации аллерген-индуцированного фенотипа БА .

При БА у детей выявлены вариативные, разнонаправленные нарушения иммунных механизмов. Корреляционный анализ иммунологических показателей с построением плеяд визуализировал особенности изменений направленности, степени и силы корреляций у детей с различными фенотипами болезни .

Фармакологический контроль и иммунотропная терапия вирусиндуцированного и аллерген-индуцированного фенотипов бронхиальной астмы у детей: клинико-иммунологические аспекты эффективности В открытом параллельном, проспективном исследовании у детей с вирусиндуцированным (n=60) и аллерген-индуцированным (n=60) фенотипами БА, проведен анализ клинико-иммунологической эффективности противовоспалительной терапии с назначением иммунотропных препаратов, методом случайной выборки в трех подгруппах сопоставимых по тяжести клинического течения, полу и возрасту. Степень коррекции иммунных нарушений в течение трех месяцев терапии мониторировали по динамике показателей врожденного и адаптивного иммунного ответа .

При оценке эффективности терапии ИГКС у детей с аллерген и вирусиндуцированным фенотипами бронхиальной астмы отмечено улучшение показателей дневных и ночных симптомов астмы, суточной потребности в 2-агонистах короткого действия и пикового объема выдоха .

При терапии ИГКС достижение полного контроля отмечено в 82,30±3,73%, частичный контроль в 8,70±3,24% случаев аллерген-индуцированной БА, полный контроль достигнут в 72,80±4,31%, частичный контроль в 20,20±3,84% при вирусиндуцированной БА. При данной программе терапии утяжеления клинического течения не отмечено, сохранялись высокая частота и триггерная значимость острых респираторных инфекций с тенденцией к увеличению числа эпизодов .

На фоне терапии ИГКС в клиническом анализе крови зафиксировано снижение абсолютного числа нейтрофилов (р0,05), эозинофилов (р0,05) и отсутствие динамики в показателях лейкоцитов и лимфоцитов при аллергениндуцированной БА .

В течение периода наблюдения при терапии ИГКС коррекции иммунных нарушений не выявлено. Динамика спонтанной продукции IFN клетками периферической крови при терапии ИГКС отсутствовала (p0,05). Отмечалось угнетение индуцированной выработки IFN (p0,05); сохранение дисбаланса спонтанной и индуцированной продукции IL-4 (p0,05) .

В группе на фоне противовоспалительной терапии ИГКС вирусиндуцированной БА, достоверным было снижение содержания лейкоцитов с (р0,05), отсутствовала динамика показателей эозинофилов, лимфоцитов и нейтрофилов .

Значимых изменений и коррекции нарушений продукции цитокинов IFN и IL-4 клетками периферической крови при терапии ИГКС в данной группе не выявлено .

Результаты исследования иммунологических показателей в динамике на фоне терапии ингаляционными глюкокортикостроидами демонстрировали сохранение иммунных нарушений, дисрегуляции продукции оппозитных цитокинов .

Недостаточность применения ИГКС в коррекции фенотипических иммунопатогенетических механизмов БА позволяет рассматривать для повышения эффективности лечения программы с иммунотропной терапией .

Включение бактериальных лизатов в комплексную терапию аллерген и вирусиндуцированного фенотипов бронхиальной астмы, оказало равнозначное влияние на клиническое течение болезни: уменьшилось количество и степень выраженности дневных и ночных симптомов, снизилась потребность в бронхолитических препаратах, нормализовались показатели пикового объема выдоха, снизился суточный разброс ПОВ, достоверно уменьшилось количество, и триггерная значимость ОРИ .

Гематологические показатели содержания и структуры лейкоцитарной формулы у детей с вирус-индуцированной БА, получавших терапию ИГКС с бактериальными лизатами, вошли в границы доверительных интервалов группы контроля (Рисунок 5) .

–  –  –

Рисунок 7 - Показатели гемограммы при аллерген-индуцированной БА, на фоне терапии ИГКС с бактериальными лизатами, *- р0,05, **р0,01 .

В иммунограмме отмечалась коррекция процессов поздней активации Т-лимфоцитов (p0,05). Другие иммунологические показатели не демонстрировали существенных сдвигов .

Применение ИГКС с бактериальными лизатами приводило к повышению спонтанной и индуцированной выработки IFN (р0,001; р0,001 соответственно), снижению индуцированной выработки IL-4 (p0,01) при аллерген-индуцированной БА .

При вирус-индуцированной БА уровень индуцированной продукции IFN достиг показателей контрольной группы (p0,01), уровень стимулированной выработки IL-4 после терапии оставался достоверно выше .

Включение глюкозаминилмурамилдипептида в терапию различных фенотипических вариантов БА приводило к повышению уровня контроля заболевания, уменьшение частоты и триггерности ОРИ .

В гемограмме детей с аллерген-индуцированной БА при терапии с глюкозаминилмурамилдипептидом купировалась эозинофилия (р0,001), число лейкоцитов (р0,001), лимфоцитов (р0,01) и нейтрофилов (р0,001) определялось в пределах доверительных интервалов группы контроля, в иммунограмме количественные (р0,05) и функциональные параметры (р0,05) хелперной, цитотоксической (р0,05) и цитолитической субпопуляции Т-лимфоцитов (р0,05) достигли показателей здоровых детей .

Терапия с глюкозаминилмурамилдипептидом у детей с вирус-индуцированной БА приводила к снижению абсолютного числа лейкоцитов (р0,001); лимфоцитов (р0,001), нейтрофилов (р0,01). В спектре иммунологических показателей зафиксировано повышение количества Т-лимфоцитов хелперных (р0,05), цитотоксических (р0,05) и цитолитических субпопуляций (р0,001), снижение удельного веса Т-лимфоцитов с экспрессией маркеров активации (р0,05) .

В сравниваемых фенотипических группах применение глюкозаминилмурамилдипептида определило достижение показателей гемограммы доверительных интервалов группы контроля, нормализацию структурных и функциональных показателей иммунограммы с восстановлением баланса продукции оппозитных цитокинов .

Выбор терапии пациента, основанный на учете фенотипа БА, более оправдан, чем эмпирическое использование фармакологических препаратов. Дозы, сочетание препаратов и последовательность их применения могут отличаться при различных фенотипах заболевания (Ильина Н.И. - 2018; Курбачева О.М. - 2013; Федосеев Г.Б. Ненашева Н.М. - 2014; Ненашева Н.М. - 2016) .

Недостаточность применения ИГКС в коррекции фенотипических иммунопатогенетических механизмов БА позволяет рассматривать для повышения эффективности лечения программы с иммунотропной терапией .

Включение бактериальных лизатов в комплексную терапию аллерген и вирусиндуцированного фенотипов бронхиальной астмы, оказало равнозначное влияние на клиническое течение болезни .

ВЫВОДЫ

1. У детей с бронхиальной астмой в Приморском крае выявлен высокий удельный вес аллерген-индуцированного (48,43±1,35 %) и вирус-индуцированного (34,9±1,85 %) фенотипов. Для вирус-индуцированного фенотипа болезни характерен дебют в младшем возрасте (3,5±0,6 лет), клиническое течение средней тяжести, преобладание нейтрофилов в периферической крови и отсутствие сенсибилизации к неинфекционным аллергенам. Аллерген-индуцированный фенотип реализуется в младшем школьном возрасте, характеризуется легким и средне тяжелым течением болезни, высокой триггерностью острой респираторной инфекции, преобладанием сенсибилизации к бытовым и эпидермальным аллергенам, формированием эозинофильного паттерна периферической крови .

2. У детей с бронхиальной астмой по сравнению со здоровыми сверстниками выявлена комбинированная иммунная недостаточность с нарушением основных этапов иммунного ответа, процессов активации, пролиферации, функциональной активности Т-лимфоцитов, цитокин продуцирующей активности клеток .

3. При реализации аллерген и вирус-индуцированного фенотипов бронхиальной астмы имеются различия в механизмах иммунитета. При вирус-индуцированном фенотипе выявлены стойкие изменения клеточного иммунного ответа с нарушением количества и функциональной активности Т- цитотоксических лимфоцитов, угнетением спонтанной и индуцированной продукции IFN. При аллерген-индуцированном фенотипе, отмечается дисбаланс субпопуляций Т-лимфоцитов с преобладанием пролиферативной активности Т-хелперов, активации продукции IL-4, при угнетении выработки IFN .

4. Терапия бронхиальной астмы ингаляционными глюкокортикостероидами не обеспечивает коррекцию иммунных нарушений. Применение бактериальных лизатов при вирус-индуцированном фенотипе приводит к нормализации структурнофункциональной организации иммунного ответа и балансу продукции оппозитных цитокинов. Глюкозаминилмурамилдипептид при аллерген-индуцированном фенотипе БА корректирует девиации показателей иммунокомпетентных клеток, продукции цитокинов .

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В ПРАКТИЧЕСКОЕ

ЗДРАВООХРАНЕНИЕ

1. В диагностике вирус-индуцированного и аллерген-индуцированного фенотипов бронхиальной астмы у детей дополнительными биомаркерами можно рекомендовать показатели спонтанной и митоген-индуцированной продукции клетками периферической крови IFN и IL-4 .

2. Для достижения контроля над симптомами бронхиальной астмы, улучшения качества жизни, необходим индивидуализированный подход к терапии, с учетом иммунных механизмов фенотипа болезни .

3. У детей с вирус-индуцированным фенотипом БА для коррекции иммунного дисбаланса и нормализации цитокин продуцирующей активности клеток, рекомендовано применение ИГКС с бактериальными лизатами .

4. Детям с аллерген-индуцированным фенотипом для оптимизации контроля бронхиальной астмы и восстановления иммунной толерантности можно рекомендовать терапию с глюкозаминилмурамилдипептидом .

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Просекова, Е.В. Митогенная активация продукции интерферона гамма и интерлейкина 4 клетками цельной крови при атопической бронхиальной астме у детей / Т.С. Ситдикова, А.И. Турянская, Н.Р. Забелина // Российский аллергологический журнал. -2016. -№3 (том 2) –С. 29-30 .

2. Ситдикова, Т.С. Фенотипические особенности бронхиальной астмы у детей в Приморье / Е.В. Просекова // Российский аллергологический журнал. -2016. том 2) –С. 34-35 .

3. Просекова, Е.В. Мониторинг лабораторных показателей иммунного статуса здоровых детей, проживающих в условиях тяжелой иммунотропной зоны индустриального города / Т.С. Ситдикова, М.С. Долгополов, А.И. Турянская, В.А. Сабыныч, Н.Р. Забелина // Клиническая лабораторная диагностика. -2017. том 62)-С. 216-221 .

4. Просекова, Е.В. Иммунные механизмы реализации вирус-индуцированного и аллерген- индуцированного фенотипов бронхиальной астмы у детей / Т.С. Ситдикова, А.И. Турянская, В.А. Сабыныч, Н.Р. Забелина//Бюллетень сибирской медицины. -2017. -т.16(2). -С. 170-179 .

5. Просекова, Е.В. Показатели адаптивного иммунного ответа у детей с вирусиндуцированным и аллерген-индуцированным фенотипами бронхиальной астмы / Т.С. Ситдикова // Российский иммунологический журнал. -2017. -№4-Том 11(20). С. 748-749 .

6. Просекова, Е.В. Мониторинг иммунных механизмов и эффективность иммунотропной терапии фенотипов бронхиальной астмы у детей/ Т.С. Ситдикова, О.Л. Жданова // Российский аллергологический журнал. -2018. -№3(15). -С. 59-67 .

7. Ситдикова, Т.С. Иммунотропная терапия аллерген-индуцированного фенотипа бронхиальной астмы у детей: обоснование и клинико-иммунологические аспекты эффективности / Е.В. Просекова, О.Л. Жданова//Российский иммунологический журнал. -2018. -№.4. –Том 12(21). -С. 743-746 .

8. Просекова, Е.В. Мониторинг натуральных киллеров, цитотоксических и цитолитических Т-лимфоцитов при вирус-индуцированной бронхиальной астме у детей / Т.С. Ситдикова // XIII Тихоокеанский медицинский конгресс с международным участием. Материалы XIII Тихоокеанского медицинского конгресса с международным участием: тез. Приложение к Тихоокеанскому медицинскому журналу. 2016.- С. 110 .

9. Просекова, Е.В. Роль Т и В-лимфоцитов в реализации вирусиндуцированной бронхиальной астмы у детей / Т.С. Ситдикова, А.И. Турянская // Научно-практическая ревматология, журнал. -2016 (54), приложение 3- С. 47-48 .

10. Ситдикова, Т.С. Иммунокомпетентные клетки у детей с различными фенотипами бронхиальной астмы/ Е.В. Просекова // Научное и образовательное пространство:

перспективы развития: материалы IV Междунар. науч.-практ. конф. - 2017. - С. 57-63 .

11. Просекова, Е.В. Цитокиновый профиль сыворотки крови при бронхиальной астме / А.И. Турянская, Т.С. Ситдикова, М.С. Долгополов, Н.Р. Забелина, В.А. Сабыныч // Здоровье. Медицинская экология. Наука. - 2017-№3(70). - С. 74-79 .

12. Ситдикова, Т.С. Распространенность, клинические и лабораторные характеристики фенотипов бронхиальной астмы у детей города Владивостока/К.А. Курочкина / XIV Тихоокеанский медицинский конгресс с международным участием. Материалы

XIII Тихоокеанского медицинского конгресса с международным участием:

тез. Приложение к Тихоокеанскому медицинскому журналу. - 2017. - С. 103 .

13. Ситдикова, Т.С. Эффективность иммунотропной терапии у детей с вирусиндуцированной бронхиальной астмой: динамика показателей врожденного и адаптивного иммунного ответа / Е.В. Просекова, А.И. Турянская // Научные исследования: теория, методика и практика. Сборник материалов IV Международной научно-практической конференции. - 2018. - С.- 33-37 .

14. Продайко, Т.С (Ситдикова Т.С.) Фенотипические особенности бронхиальной астмы и оптимизация базисной терапии у детей / А.А. Кабиева, Т.Г. Середа, Т.Г. Ваева // Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии, клинической лабораторной диагностики: материалы XII Региональной научно-практической конференции. – Владивосток: Мор. гос. ун-т. - 2014. – С. 12-18 .

15. Власова, А.О. Распространенность фенотипов бронхиальной астмы у детей в городе Владивостоке/Т.С. Продайко (Т.С. Ситдикова), Е.В. Просекова // Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии, клинической лабораторной диагностики: тез. материалы XIII Региональной научно-практической конференции. – Владивосток: Мор. гос. ун-т. С. 27-29 .

Методические рекомендации:

1. Особенности показателей врожденного и адаптивного иммунитета здоровых детей, проживающих в городе Владивостоке / Е.В. Просекова, Т.С. Ситдикова, А.И. Турянская, М.С. Долгополов, В.А. Сабыныч, Е.М. Ибрагимова// Методические рекомендации. - Владивосток. - 2017. - с. 16 .

2. Распространенность, клинико-иммунологические особенности и программы фармакологического контроля различных фенотипов бронхиальной астмы у детей в приморье / Е.В. Просекова, Т.С. Ситдикова, А.И. Турянская, М.С. Долгополов, В.А. Сабыныч, Е.М. Ибрагимова // Методические рекомендации. – Владивосток. - 2017 .

- с.28 .

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

БА - бронхиальная астма ИГКС - ингаляционный глюкокортикостероид АСТ - тест по контролю над симптомами астмы (Asthma Control Test) CD - кластер дифференцировки CD3+ - зрелые Т-лимфоциты CD19+ - зрелые В-лимфоциты CD4+ - Т-хелперы/индукторы CD8+ - Т-цитотоксические клетки CD16+ - натуральные киллеры HLA-DR - мембранный антиген поверхности лимфоцитов IL - интерлейкин IFN - интерферон гамма Th 1 - Т-хелперы 1-го порядка Th 2 - Т-хелперы 2-го порядка Ситдикова Татьяна Сергеевна

ИММУННЫЕ МЕХАНИЗМЫ РЕАЛИЗАЦИИ ФЕНОТИПОВ

И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ

У ДЕТЕЙ 14.03.09-Клиническая иммунология, аллергология




Похожие работы:

«ИНСТРУКЦИЯ ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ ТАРЕЛЬЧАТЫЙ ШЛИФАВАЛЬНЫЙ СТАНОК JDS-12 ВМХ Тул Груп АГ (WMH Tool Group AG) Банштрассе 24, CH-8603 Шверценбах Тарельчатый шлифовальный станок JDS-12 1. ОБЩИЕ УКАЗАНИЯ Данный тарельчатый шлифовальный станок предназначен исключительно для шлифования...»

«ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ ГОСТ Р м э к НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ 611912— РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПЕЧАТНЫЕ УЗЛЫ Часть 2 Поверхностный монтаж . Технические требования IEC 61191-2:1998 Printed board assemblies — Part 2: Sectional specification — Requirements for surface mount soldered assemblies (IDT) Из...»

«СИГМА СКШС-01 Сетевой контроллер шлейфов сигнализации Руководство по эксплуатации НЛВТ.425641.104 РЭ Сетевой контроллер шлейфов сигнализации СКШС-01 Руководство по эксплуатации НЛВТ.425641.104РЭ Редакция 13 19.0...»

«Оглавление Введение 5 1 Дискретные модели размещения 19 1.1 Простейшая задача размещения................ 20 1.2 Многостадийная задача размещения.............. 26 1.3 Задачи размещения с предпочтениями клиентов....... 29 1.4 А...»

«АССОЦИАЦИЯ АВТОМОБИЛЬНЫХ ИНЖЕНЕРОВ 101-я Международная научно-техническая конференция "ТЕХНИЧЕСКОЕ РЕГУЛИРОВАНИЕ В ОБЛАСТИ АВТОТРАНСПОРТНЫХ СРЕДСТВ" Семинар "Развитие международного нормирования в рамках Всемирного форума для согласования Правил в области транспортных средств (WP.29)" 6-7 декабря 2017 года ПРОГРАММА И...»

«4. Коротич В.И. Теоретические основы технологии окускования металлургического сырья. Агломерация: учеб. Пособие / В.И.Коротич, Ю.А.Фролов, Л.И.Каплун. – Екатеринбург: ГОУ ВПО УГТУ-УПИ, 2005. –417 с.5. Коротич В.И....»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МАШИНОСТРОИ...»







 
2019 www.mash.dobrota.biz - «Бесплатная электронная библиотека - онлайн публикации»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.